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類型分類:
科普知識
數據分類:
FFC連接器

RNA提取時RNA降解原因

發布日期:2022-04-17 點擊率:33

 

1 ) 新鮮細胞:

裂解液的量不足,使得裂解不充分。

 

2 ) 新鮮組織:

某些含有內源性核酸酶的樣品,很難避免RNA酶的降解,建議采用的方法為在液氮條件下將組織研碎,并且,勻漿時采用更多的裂解液。

 

3 ) 冷凍樣品:

樣品取材后應該迅速置于液氮中冷凍存放,然后轉移到-70℃冰箱存放。如果未經液氮速冷直接轉移到-70℃冰箱存放,會造成RNA緩慢降解。樣品研磨后,在液氮剛剛揮發完時,將樣品迅速轉移到含裂解液的容器中,立即混勻勻漿。

 

4 ) 外源 RNA 酶的污染:

試劑、器械等實驗用品應該采用DEPC 水滅菌處理。

 

5 ) 內源 RNA 酶的污染:

抑制劑失效或者用量不夠,實驗樣品過多或者勻漿溫度過高。

 

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