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HEPES(4-羥yi基pai嗪乙磺酸,又名N-(2-羥yi基)pai嗪-N'-2-乙烷磺酸)是一種兩性離子緩沖劑,屬于good's緩沖劑,25℃時pKa 7.45,pH緩沖范圍為6.8-8.2,因此廣泛應用于細胞培養基、IVD試劑盒、化妝品、醫藥等領域。CN102827804A專li中,介紹了HEPES在細胞培養基中應用,該培養基主要包含7部分組成,具體為:維生素、脂類、氨基酸、無機鹽、蛋白水解物、緩沖成分和添加物,各個組成部分具體信息如下:
1.維生素由12種成分構成,具體為肌醇,維生素,磷酸吡哆醇,磷酸吡哆醛,鈷銨素,煙酰胺,核黃素,鹽酸硫胺素,D-泛酸鈣,葉酸,生物素(Biotin)以及氯化膽堿;
2.脂類由2種成分構成,具體為亞油酸和嵌段式聚醚F68(PluronicF-68);
3.氨基酸由21種成分構成,具體為L-色氨酸,L-半胱氨酸,L-異亮氨酸,L-亮氨酸,L-纈氨酸,L-精氨酸鹽酸鹽,L-組氨酸鹽酸鹽,L-賴氨酸,L-蛋氨酸,L-谷氨酸,L-苯丙氨酸,L-天冬酰,甘氨酸,L-脯氨酸,L-丙氨酸,L-天冬氨酸,L-絲氨酸,L-蘇氨酸,L-谷氨酰胺,L-胱氨酸鹽酸鹽以及L-酪氨酸二鈉鹽;
4.無機鹽由11種成分構成,具體為六水氯化鎂,無水硫酸鎂,無水氯化鈣,氯化jia,氯化鈉,一水磷酸二氫鈉,磷酸氫二鈉,七水硫酸鋅,九水合硝酸鐵,ya硒酸na以及五水硫酸銅;
5.蛋白水解物可以為乳蛋白水解物,酵母水解物或者植物水解物;
6.緩沖成分為碳酸氫鈉和HEPES;
7.添加物由6種成分構成,具體為D-葡萄糖,丙酮酸鈉,還原型谷胱甘肽,次huang嘌呤鈉鹽,腐胺和硫辛酸。
本專li有以下有益效果:
1.該培養基使用常規方法制備,可支持Vero在方瓶、滾瓶上生長,并可支持Vero細胞微載體懸浮培養和微載體懸浮規模放大培養。另外也可以作為病毒維持液,實現病毒無血清生產。
2.成本低廉,可實現規模化生產。
參考文獻
CN102827804A 適用于Vero細胞微載體懸浮放大培養的培養基及方法.
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