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科普知識
數(shù)據(jù)分類:
分光光度計

紫外可見分光光度計使用說明

發(fā)布日期:2022-10-09 點擊率:68

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    紫外可見分光光度計來自于美國,產(chǎn)品包含光源,單色器,吸收池,檢測器和顯 示器等,它是一款對物質(zhì)進(jìn)行定性,定量以及結(jié)構(gòu)分析的儀器。這款儀器和人們常 用的可見光光度計有有很大的區(qū)別,除了波長范圍,使用光源都不一樣等,價格也 是后者要要貴一些;平時的使用和注意事項不一樣的,今天就先來學(xué)習(xí)一下紫外可見分光光度計使用方法:
    1.試驗中所用的量瓶、移液管均應(yīng)經(jīng)檢定校正、洗凈后使用。
    2.使用的石英吸收池必須潔凈。用于盛裝樣品、參比及空內(nèi)溶液的吸收池,當(dāng)裝 入同一溶劑時,在規(guī)定波長測定吸收池的透光率,如透光率相差在0.3%以下者可配 對使用,否則必須加以校正。
    3.取吸收池時,手指拿毛玻璃面的兩側(cè)。裝盛樣品溶液以池休積的4/5為度,使用 揮發(fā)性溶液吋應(yīng)加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應(yīng)無殘留溶劑。 為防止溶劑揮發(fā)后溶質(zhì)殘留在池子的透光面,可先用蘸有空白溶劑的擦鏡紙擦拭, 然后再用干擦鏡紙拭凈。吸收池放入樣品室時應(yīng)注意每次放入方向相同。使用后用 洗液及水沖洗干凈,晾干防塵保存,吸收池發(fā)現(xiàn)污染不易洗凈時可用硫酸發(fā)煙硝酸(3 :1V/V)混合液稍加浸泡后,洗凈備用。如用重鉻酸鉀清潔液清洗時,吸收池不貧在 清潔液中長時間浸泡,否則清潔液中的重鉻酸鉀結(jié)晶會損壞吸收池的光學(xué)表面,并 應(yīng)充分甩水沖洗,以防重鉻酸鉀吸附于吸收池表面。
    4.測定前應(yīng)先檢查所用的溶劑在測定供試品所用的波長附近是否符合要求,可用 lcm石英吸收池盛溶劑以空氣為空白(即參比光路中不放置任何物質(zhì))測定其吸收度 ,應(yīng)符合規(guī)定。
    5.稱量應(yīng)按藥典規(guī)定要求。配制測定溶液時稀釋轉(zhuǎn)移次數(shù)應(yīng)盡可能少,轉(zhuǎn)移稀釋 時所取容積一般應(yīng)不少于5cm。含量測定供試品應(yīng)稱取2份,如為對照品比較法,對 照品一般也應(yīng)稱取2份。吸收系數(shù)檢查也應(yīng)稱取供試品2份,平行操作,每份結(jié)果對 平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。作鑒別或檢查可取樣品1份。
    6.供試品測定溶液的濃度,除各該品種項下已有注明者外,供試品溶液的吸收度 以在0.3~0.7之間為宜,吸收度讀數(shù)在此范圍誤差較小,并應(yīng)結(jié)合所用儀器吸收度線 性范圍,配制合適的讀數(shù)濃度。
    7.選用儀器的狹縫譜帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值 會偏低,狹縫寬度的選擇應(yīng)以減小狹縫寬度吋供試品的吸收度不揮增加為準(zhǔn),對于 紫外測定的部分品種,可以使用2nm縫寬,但對某些品種如青霉素鉀及鈉的吸收度 檢查則需用lnm縫寬或更窄,否則其264nm的吸收度會偏低。
    8.測定時除另有規(guī)定者外,應(yīng)在規(guī)定的吸收峰±2nm處,再測幾點的吸收度,以核 對供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度的波長作為測定波長,除另有規(guī) 定外吸收度波長應(yīng)在該品種項下規(guī)定的波長±lnm以內(nèi),否則應(yīng)考慮試樣的同一 性、純度以及儀器波長的準(zhǔn)確度
    9.除另有規(guī)定外,比色法所用的空內(nèi)系指用同休積的溶劑代替對照品或供試品溶 液,然后依次加入等量的相應(yīng)試劑,并用同樣方法處理。
    10.當(dāng)吸收度和濃度關(guān)系不呈線性關(guān)系時,應(yīng)取數(shù)份梯度量的對照濃度,用溶劑補(bǔ) 充至同一休積,顯色后測定各份溶液的吸收度,然后以吸收度與相應(yīng)的濃度繪制標(biāo) 準(zhǔn)曲線,再根據(jù)供試品的吸收度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出其含量。

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