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　　高效色譜儀色譜柱的使用事項(xiàng)包括色譜柱的平衡、再生和維護(hù)等。

　　一、色譜柱的平衡：

　　高效液相色譜儀反相色譜柱是保存在乙腈中，新柱應(yīng)先用10～20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱，一定確保分析樣品所使用的流動相與乙腈－水互溶。每天用足夠的時(shí)間以流動相平衡色譜柱，會在處理問題方面獲得的“補(bǔ)償”，而且色譜柱的壽命會變得更長。

　　平衡操作步驟：

　　1、平衡開始時(shí)，將流速緩慢提高，用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線。緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低，需要較長時(shí)間來平衡。

　　2、如果使用的流動相中含有緩沖鹽，應(yīng)注意用純水“過渡”。即每天分析開始前，必須先用純水沖洗30min以上，再用緩沖鹽流動相平衡。分析結(jié)束后，必須先用純水沖洗30min以上，除去緩沖鹽之后，再用甲醇沖洗30min保護(hù)色譜柱。

　　二、色譜柱的再生：

　　1、建議用來沖洗色譜柱的溶劑體積：

　　（1）Ф4×125mm色譜柱：

　　柱體積為1.6mL，所用溶劑體積為30mL。

　　（2）Ф4×250mm色譜柱：

　　柱體積為3.2mL，所用溶劑體積為60mL。

　　（3）Ф10×250mm色譜柱：

　　柱體積為20mL，所用溶劑體積為400mL。

　　2、再生方法：

　　（1）極性固定相的再生：

　　正庚烷，乙酸乙酯，丙酮，乙醇，水。

　　（2）非極性固定相的再生：

　　水，異丙醇，乙腈，水。

　　3、注意事項(xiàng)：

　　（1）在對用NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時(shí)，由于NH2可能以銨根離子形式存在，因此應(yīng)在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后用水沖洗至堿溶液完全流出。

　　（2）如果用有機(jī)溶劑－水不能完全洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì)，在水洗后加用0.05M的稀硫酸沖洗非常有效。

　　三、色譜柱的維護(hù)：

　　1、使用預(yù)柱、保護(hù)柱和分析柱。硅膠在極性流動相和離子性流動相中有一定的溶解度。

　　2、大多數(shù)反相色譜柱的pH值穩(wěn)定范圍是2～7.5，盡量不超過該色譜柱的pH值范圍。

　　3、避免流動相組成和極性的劇烈變化。

　　4、流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理。

　　5、如果使用極性或離子性緩沖溶液作流動相，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢后沖洗干凈色譜柱，并保存于甲醇或乙腈中。

　　6、氯化物溶劑對色譜柱有一定腐蝕，柱和連接管內(nèi)不能長時(shí)間存留此類溶劑，以避免腐蝕。