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　　高效液相色譜儀分析中，選擇流動相時應考慮流動相與填料的作用、純度、與檢測器的匹配、粘度、對樣品的溶解度和樣品回收等方面。

　　1、流動相與填料的作用：

　　流動相應不改變填料的任何性質(zhì)。

　　低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機相會溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。

　　堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。

　　酸性流動相不能用于氧化鋁和氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。

　　2、純度：

　　色譜柱的壽命與大量流動相通過有關，特別是當溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時。

　　3、與檢測器的匹配：

　　當使用UVD時，所用流動相在檢測波長下應沒有吸收或吸收很小。

　　當使用RID時，應選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動相，以提高靈敏度。

　　4、粘度：

　　高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴散和傳質(zhì)，使柱效降低，還會使柱壓增加，分離時間延長。盡量選擇沸點在100℃以下的流動相。

　　5、對樣品的溶解度：如果溶解度欠佳，樣品會在色譜柱內(nèi)沉淀，不但影響純化分離，而且會使色譜柱惡化。

　　6、樣品回收：應選用揮發(fā)性溶劑。

　　高效液相色譜儀分析選擇流動相時應注意的問題：

　　1.盡量使用高純度溶劑作流動相，防止微量雜質(zhì)長期累積損壞色譜柱和使檢測器噪聲增加。不純的溶劑會引起基線不穩(wěn)，產(chǎn)生偽峰。

　　2.避免流動相與固定相發(fā)生作用而使柱效下降和損壞色譜柱，如使固定液溶解流失和酸性溶劑破壞氧化鋁固定相等。

　　3.樣品在流動相中應有適宜的溶解度，防止產(chǎn)生沉淀并在柱中沉積。

　　4.流動相粘度低（粘度適中）。若使用高粘度溶劑，會增高壓力，不利于分離。常用低粘度溶劑有丙酮、甲醇和乙腈等。但粘度過低的溶劑也不宜采用，如戊烷等，它們?nèi)菀自谏V柱和檢測器內(nèi)形成氣泡，影響分離。

　　5.化學穩(wěn)定性好。

　　6.流動相應滿足檢測器的要求。

　　對于紫外吸收檢測器，應注意選用檢測器波長比溶劑的紫外截止波長長。所謂溶劑的紫外截止波長是指當小于截止波長的輻射通過溶劑時，溶劑對此輻射產(chǎn)生強烈吸收，此時溶劑被看作是光學不透明的，會嚴重干擾組分的吸收測量。

　　對于示差折光檢測器，要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動相，以達到zui高靈敏度。

　　液相色譜儀，看你分離的樣品的種類，看流動相是否和樣品互溶，分離程度，一般加水多少，甲醇，乙腈很多種，看樣品的沸點，溶解性。

標簽:                                    高效液相色譜儀